Reactivo de transfección SweTransDNA

 

Nombre del producto	Gato. No.	Especulación.
Reactivo de transfección SweTransDNA	G1805-0.5ML	0.5 ml

 

 

Este producto es una nueva generación de reactivo de transfección de ADN con excelente rendimiento de tipo polímero catiónico, que tiene una excelente capacidad de unión y entrega de ADN, y puede usarse para la transfección de ADN plasmídico. Este producto tiene las ventajas de una toxicidad muy baja, buena estabilidad, transfección simple y fácil, buena reproducibilidad, etc. Puede usarse para la transfección transitoria y la transfección estable de muchos tipos de células.

 

 

Enviar con hielo mojado; Almacenar a 2-8 grado durante 12 meses.

 

 

Componente	G1805-0.5ML
Reactivo de transfección SweTransDNA	0.5 ml
Manual	1 pieza

 

 

1. Preparación previa a la transfección de células adherentes (6-placa de pocillos, por ejemplo; otras especificaciones se refieren a la tabla adjunta):

a. Un día antes de la transfección, las células se plantan uniformemente en la placa de pocillos a una densidad adecuada para que las células converjan al 60-85 % durante la transfección formal;

b. Antes de la transfección, retire el medio de cultivo celular original, lave las células con tampón PBS a temperatura ambiente 1-2 veces y luego reemplácelas con 1,9 ml de medio basal sin suero o con bajo contenido de suero (menos del 5 %) (diferentes las células tienen diferente dependencia del suero, ajuste el porcentaje de suero según corresponda);

do. Las células se colocan en una incubadora de cultivo celular después de que se preparen los complejos de transfección e intercambio de fluidos;

2. Preparación de células en suspensión para la transfección:

a. El día de la transfección, después de centrifugar la cantidad adecuada de células para eliminar el medio, resuspender las células en medio basal sin suero o con bajo contenido de suero (5 % o menos) hasta la concentración adecuada e inocular 1,9 ml de la resuspensión uniformemente. en la placa de pocillos;

b. Coloque la placa de pocillos inoculada con células suspendidas en una incubadora de cultivo celular y comience a preparar el complejo de transfección (la relación de volumen entre el complejo de transfección y el medio de cultivo se puede ajustar adecuadamente haciendo referencia a la relación de células adherentes);

3. Preparación del complejo de transfección:

a. Preparar la Solución A: 50 μL de medio basal libre de suero con 2 ug de ADN plasmídico, inflado y mezclado bien;

b. Preparación de la solución B: se soplaron y mezclaron 50 μL de medio basal sin suero con 2-10 μL de reactivo de transfección SweTransDNA;

do. Deje el Líquido A y el Líquido B a temperatura ambiente durante 5 minutos;

d. Agregue el líquido B al líquido A, sople suavemente para mezclar bien y continúe incubando a temperatura ambiente durante 20 minutos para formar el complejo reactivo de transfección de ADN;

4. Transfección de células:

a. El complejo reactivo de transfección de ADN obtenido en el paso anterior se agrega a la placa de orificio con el líquido reemplazado en el "Paso 1" o "paso 2";

b. Después de agitar suavemente la placa de cultivo para inducir que el medio que contiene el complejo de transfección se mezcle bien con el medio en la placa de pocillos, la placa de pocillos se incuba a 37 grados en una incubadora con CO2 al 5%;

do. Después de 4-6 h de incubación, las diferentes células se cambian al medio fresco correspondiente y se colocan en la incubadora para su posterior incubación;

d. Después de 24-48 h de transfección, se observan o recogen las células.

 

 

1. Utilice células sanas en buenas condiciones y se recomienda pasar las células reanimadas al menos dos veces antes de la transfección.

2. Utilice ADN plasmídico de alta calidad y libre de endotoxinas.

3. El producto se utiliza por primera vez, se recomienda empacar por separado para evitar congelaciones y descongelaciones repetidas.

4. Bajo la premisa de la tolerancia celular, el tiempo de incubación del complejo de reactivo de transfección de ADN se puede extender adecuadamente y el efecto de transfección es mejor. La proporción de ADN a reactivos de transfección se puede ajustar según corresponda.

5. Para su salud y seguridad, use bata de laboratorio y guantes durante la operación.

 

Tabla: Cantidad de reactivos de transfección y ADN necesarios para diferentes placas de cultivo

plato de cultura	Área de pozo único	Número de células inoculadas	transfección de ADN		volumen total
			Reactivo de transfección	ADN
96-placa de pocillos	{}.3 cm²	(2.0-4.0)×104	0.2-1.0 μL	{0}.2 ug	0.1 ml
24-placa de pocillos	2.{1} cm²	(1.2-2.4)×105	0.4-2.0 μL	{0}.4 ug	0.5 ml
12-placa de pocillos	4.{1} cm²	(2.4-4.8)×105	1.0-5.0 μL	1.0 ug	1.0 mililitros
6-placa de pocillos	9,5 cm²	(6.0-10)×105	2.0-10 μL	2.{1} ug	2.0 mililitros

 

¡Solo para uso en investigación!

 

 

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