Solución de tinción Hoechst 33342

Hoechst 33342 (bisBenzimida H 33342, HOE 33342), la fórmula molecular es C₂₇H₂₈N₆O·3HCl, el peso molecular es 561,93, el número CAS es 23491-52-3. Es un tinte fluorescente azul que puede penetrar la membrana celular para teñir el ADN en el núcleo. Este tinte tiene una fluorescencia débil en la solución, pero la fluorescencia se vuelve más brillante cuando se combina con el pequeño surco del ADN en el área enriquecida con AT, por lo que se usa para la tinción nuclear ordinaria o la tinción de ADN convencional.

Este producto se proporciona como una solución con una concentración de 1 mg/ml de Hoechst 33342. Cuando se utiliza para teñir, la concentración de trabajo habitual es 0.5-10 ug/ml. Hoechst 33342 tiene una longitud de onda de excitación máxima de 346 nm y una longitud de onda de emisión máxima de 460 nm; Después de combinarse con ADN bicatenario, la longitud de onda máxima de excitación es de 350 nm y la longitud de onda máxima de emisión es de 461 nm. Puede usarse para marcar el núcleo de células o tejidos en condiciones fijas o no fijas, y puede detectarse mediante un microscopio de fluorescencia o un citómetro de flujo y otros instrumentos.

Envíe con hielo húmedo; almacene a -20 grados protegido de la luz, válido dentro de 12 meses.

1. La solución de tinción Hoechst 33342 (1 mg/ml)fue diluido a0.5-10 ug/ml Trabajo de tinción Hoechst 33342solucióncon PBS u otro tampón adecuado;

2. Para muestras de células y tejidos fijadas:

a. Para muestras de células o tejido fijadas, retire el fijador después de la fijación y lave 2-3 veces con PBS u otro tampón adecuado, 3-5 min cada vez (si detecta células en suspensión, siga la operación de rutina de las células en suspensión). y agregar pasos como la centrifugación para todos los experimentos);

b. (opcional) Si las células o tejidos fijados necesitan procesarse para tinción por inmunofluorescencia, etc., se prioriza el procesamiento relevante y se realiza la tinción Hoechst 33342 después del procesamiento;

do. Tome una cantidad adecuada de solución de trabajo de tinción Hoechst 33342 para teñir las células o tejidos fijados, cubra la muestra e incube a temperatura ambiente durante aproximadamente 5 minutos;

d. Después de retirar la solución de trabajo de tinción Hoechst 33342, lave con PBS u otro tampón adecuado 2-3 veces durante 3-5 min cada vez;

mi. Sellarlo u observarlo directamente bajo un microscopio de fluorescencia, Ex/Em: 350 nm/460 nm.

3. Para células vivas o tejidos cultivados:

a. Agregue una cantidad adecuada de solución de trabajo de tinción Hoechst 33342 a la muestra que se va a teñir. La muestra debe quedar completamente cubierta. Incubar en una incubadora a 37 grados durante 10-20 min. Por lo general, se agrega 1 ml de solución de tinción a un pocillo de una placa de seis pocillos; se deben agregar 100 μl de solución de tinción a un pocillo de la placa 96-pocillos;

b. Retire la solución colorante, lave 2-3 veces con PBS u otro tampón adecuado, 3-5 min cada vez;

do. Obsérvelo directamente bajo un microscopio de fluorescencia, Ex/Em: 350 nm/460 nm.

1. La concentración de incubación y el tiempo de la solución de trabajo de tinción Hoechst 33342 se pueden ajustar según la situación real.

2. Los tintes fluorescentes tienen problemas de extinción, intente completar la detección el mismo día después del teñido; Utilice tabletas de montaje antifluorescencia (recomendado Servicebio G1401) para ralentizar la extinción de la fluorescencia.

3. Para su salud y seguridad, use batas y guantes de laboratorio durante la operación.

¡Solo para uso en investigación!

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