5 × tampón de transferencia de tris-glicina

Este producto es una solución concentrada 5x, con los componentes principales de Tris 100 mM y glicina 0,96 M, sin metanol ni etanol absoluto. Antes de usar, tomar 200 mL de este producto y agregar 500 mL de agua desionizada o agua destilada, mezclar bien, luego agregar 200 mL de etanol absoluto, mezclar bien y finalmente agregar agua desionizada o agua destilada hasta un volumen final de 1 L. Después de mezclar bien, se añadió un tampón de transferencia de Tris-glicina 1x con Tris 20 mM, glicina 192 mM, etanol absoluto al 20 % y pH. 8.2-8.6 a 25 grados. Es adecuado para transferencia húmeda o semiseca en experimentos de transferencia Western.

Enviar y almacenar a temperatura ambiente; Válido por 12 meses.

1. Para proteínas de peso molecular pequeño a mediano (25-70 kDa), se recomienda utilizar una condición de transferencia de 300 mA durante aproximadamente 30 minutos.

2. Para proteínas moleculares grandes normales, el tiempo de transferencia se puede ampliar según sea necesario y se recomienda utilizar una condición de transferencia de 300 mA durante 45-60 minutos.

3. Para proteínas moleculares pequeñas por debajo de 20 kDa, se recomienda utilizar una membrana de PVDF con un tamaño de poro más pequeño, de 0,22 μm. Las condiciones de transferencia pueden ser 200 mA durante 20-25 minutos o 300 mA durante 15-20 minutos. Alternativamente, el contenido de metanol (puede reemplazarse con etanol) se puede aumentar al 25 % para mejorar la fijación de proteínas moleculares pequeñas del gel.

4. En el caso de proteínas con pesos moleculares especialmente grandes, el tiempo de transferencia puede ampliarse aún más. Se recomienda utilizar una condición de transferencia de 300 mA durante 60-90 minutos o más. Además, se puede agregar SDS al tampón de transferencia hasta una concentración final de aproximadamente 0,025-0.1% para mejorar la liberación de proteínas del gel. Debido al mayor tiempo de transferencia, se debe prestar atención al efecto de enfriamiento del módulo de enfriamiento y, si es necesario, se puede reemplazar un nuevo módulo de enfriamiento a mitad de camino.

1. Utilice la solución de trabajo lo antes posible después de la preparación. Se recomienda diluir el reactivo con agua purificada de laboratorio (G4701-500ML).

2. La cristalización puede ocurrir a temperaturas ambientales más bajas, lo cual es un fenómeno normal. Se puede calentar a 37 grados, tiempo durante el cual se mezcla boca abajo varias veces y luego se diluye para su uso después de que se haya disuelto por completo.

3. El color normal de este producto es incoloro y transparente; si aparece de color marrón claro o marrón amarillento, debe desecharse inmediatamente.

4. Utilice bata de laboratorio y guantes desechables durante su manipulación.

¡Solo para uso en investigación!

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