Introducción del producto
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Nombre del producto |
Gato. No. |
Especulación. |
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Kit de tinción H&E (hematoxilina y eosina) |
G1005-100ML |
2×100ml |
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G1005-500ML |
2×500ml |
Descripción
La tinción HE, la tinción combinada de hematoxilina y eosina, es el método técnico más básico y ampliamente utilizado en la enseñanza e investigación de histología, embriología y patología. La tinción con hematoxilina es alcalina y provoca principalmente que la cromatina en el núcleo y los ácidos nucleicos en el citoplasma se coloreen de azul a azul violeta; La eosina es un tinte ácido que principalmente hace que los componentes del citoplasma y la matriz extracelular se coloreen de rojo. La tinción HE se puede utilizar para observar y comparar la morfología y estructura de tejidos normales y enfermos, y se puede utilizar para determinar o identificar inicialmente sustancias anormales que aparecen en tejidos y células enfermos.
En este conjunto de tinciones HE, la concentración de hematoxilina en la solución de tinción con hematoxilina es {{0}}.5 %, y la concentración de eosina en la solución de eosina Y (alcohólica) es del 0,05 %. Tejido o célula teñida con este producto, el núcleo es de azul a azul violeta, el citoplasma es rojo y el contraste entre el citoplasma y el núcleo es nítido.
Condiciones de almacenamiento y manipulación
Almacenar y transportar a temperatura ambiente. Válido por 18 meses.
Componente
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ComponenteNúmero |
Componente |
G{}ML |
G{}ML |
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G1005-1 |
Solución de hematoxilina |
100ml |
500ml |
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G1005-2 |
Solución de eosina Y (alcohólica) |
100ml |
500ml |
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Manual |
1 pieza |
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Preparación previa al experimento
Prepare su propia solución de diferenciación de hematoxilina (G1039recomendado), solución azulante de hematoxilina (G1040recomendado), xileno, etanol en gradiente y goma neutra.
Instrucciones de uso
1. Preprocesamiento de muestras
(1) Para secciones de parafina: las secciones se desparafinaron secuencialmente con xileno durante 10 minutos, se reemplazaron por xileno fresco durante 10 minutos, etanol anhidro durante 5 minutos, etanol anhidro fresco durante 5 minutos, etanol al 90% durante 5 minutos, etanol al 75% durante 5 minutos. min y se lavó con agua del grifo.
(2) Para secciones congeladas: las secciones congeladas almacenadas a -20 grados deben dejarse reposar durante 5-10 minutos para que vuelvan a la temperatura ambiente. Si se requiere fijación, las secciones deben lavarse con agua del grifo a temperatura ambiente con el fijador requerido.
2. Tinción HE
(1) Tinción con hematoxilina:las secciones tratadas anteriormente se tiñeron con solución de tinción con hematoxilina durante 3-5 min y se lavaron con agua del grifo;
(2) Diferenciación:las secciones se enjuagaron bien con una solución de diferenciación de hematoxilina durante 2-5 s con agua corriente;
(3) De vuelta al azul:La hematoxilina vuelve a la solución azul durante 2-5 s, agua del grifo y agua corriente para enjuagar bien.
(4) Tinción de eosina:las secciones se deshidrataron con un gradiente de etanol al 85% y al 95% durante 5 minutos cada uno. Luego se tiñó en eosina (alcohólica) durante 5 min y se deshidrató dos veces con etanol absoluto durante 5 min cada una.
(5) Transparente:Luego, las rodajas se deshidratan con etanol absoluto fresco durante 5 minutos, el xileno es transparente durante 5 minutos y el xileno fresco se reemplaza por transparente durante 5 minutos.
(6) Montaje:Agregue goma neutra gota a gota para montar.
Nota
1. Después de la tinción, se utiliza una solución específica para eliminar el exceso de tinte adherido al tejido, proceso conocido como diferenciación, y la solución utilizada se denomina solución de diferenciación. Comúnmente se usa una concentración baja de ácido clorhídrico como solución de diferenciación en la tinción HE porque el ácido destruye la estructura estructural tipo quinona de la hematoxilina, lo que hace que el pigmento se separe del tejido y se desvanezca. Después de teñir el tejido con hematoxilina, se debe diferenciar para eliminar el exceso de tinte adsorbido y adsorbido de manera no específica del tejido antes de realizar la tinción con eosina para garantizar que los núcleos y el citoplasma tengan un color distintivo. Se puede utilizar la solución de diferenciación de hematoxilina G1039. Durante el proceso de diferenciación, el tiempo de diferenciación debe ajustarse adecuadamente según el grosor de la sección de tejido, el tipo de tejido, etc. en combinación con la observación microscópica.
2. El retorno del azul después de la tinción con hematoxilina en la tinción HE es importante. La hematoxilina es iónica y roja en condiciones ácidas; es azul en condiciones alcalinas. Las secciones de tejido son rojas o rosadas después de la diferenciación con una solución de diferenciación ácida y deben lavarse inmediatamente para terminar la diferenciación y luego usar una solución alcalina débil para producir hematoxilina; este proceso es el retorno al efecto azul. Si no existe una solución azulante especial, con la inmersión en agua tibia también se puede hacer que el núcleo celular vuelva al color azul, sólo que hay que esperar un poco más. Recomendamos la solución de azulado de hematoxilina G1040.
3. El grado de tinción con hematoxilina y eosina se puede ajustar según la necesidad del tiempo de tinción.
4. Si la temperatura de almacenamiento es inferior a 15 grados, los cristales de alumbre pueden precipitar de la solución de hematoxilina, lo que no afectará la calidad del producto. Debe sellarse y almacenarse después de cada uso para evitar que se evaporen los principios activos.
5. La pureza del etanol anhidro utilizado para la deshidratación después del teñido debe ser superior al 99,9%. Si el etanol contiene agua, el color de la eosina se desvanecerá y provocará un teñido desigual.
6. Tanto el tinte de hematoxilina como el de eosina (soluble en alcohol) son reutilizables y cada 100 ml de tinte se pueden usar para teñir aproximadamente 150 secciones. Reemplace el tinte por uno nuevo cuando la coloración del tejido o de las células sea significativamente más clara o anormal.
7. Utilice bata de laboratorio y guantes desechables durante la operación.
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