Introducción del producto
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Nombre del producto |
Cat.No. |
Especulación. |
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ADN polimerasa Taq U (para ADN tratado con bisulfito) |
G3346-50 |
50 recetas |
Descripción/Introducción del producto
La ADN polimerasa Taq U (para ADN tratado con bisulfito) está diseñada para amplificar el ADN molde que contiene uracilo después de la conversión con bisulfito, que se utiliza para la investigación de la metilación genómica. El producto incluye ADN polimerasa Taq U de arranque en caliente que puede leer plantillas de ADN que contienen uracilo. Al mismo tiempo, la hibridación no específica de cebadores se puede reducir eficazmente debido al efecto inhibidor de los anticuerpos sobre la ADN polimerasa a baja temperatura. 5×Taq U Reaction Buffer es un sistema tampón especialmente optimizado para la amplificación de ADN dañado después de la transformación, que puede mejorar eficazmente la especificidad y el rendimiento de la amplificación.
Condiciones de almacenamiento y manipulación
Se envía con hielo húmedo y se almacena a -20 grados; Válido por hasta 12 meses.
Producto Contenido
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Número de componente |
Componente |
G3346-50 |
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3346-1 |
ADN polimerasa Taq U |
12.5 µL |
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3346-2 |
5×Tampón de reacción Taq U |
1,25 mililitros |
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3346-3 |
MgSO4 25 mm |
250 µL |
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3346-4 |
dNTP (2,5 mM cada uno) |
150 µL |
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Manual |
una copia |
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Ensayo Protocolo / Trámites
1. Sistema de reacción (50 μL):
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Componente |
Volumen |
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5×Tampón de reacción Taq U |
10 μL |
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MgSO4 25 mm |
5 μL |
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dNTP (2,5 mM cada uno) |
3 μL |
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Cebador directo (10 µM)a |
2 μL |
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Cebador inverso (10 µM)a |
2 μL |
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Plantillab |
50 ng-100 ng |
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ADN polimerasa Taq U |
0.25 μL |
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Agua libre de nucleasas |
Hasta 50 µL |
a: La concentración final de cebadores varía de {{0}}.2 a 1,0 μM, y la concentración recomendada de cebadores es 0,4 μM. Cuando no hay producto de amplificación o amplificación no específica, se pueden ajustar MgSO4 y dNTP para mejorar los resultados de la amplificación.
b: Cuando se utiliza el ADN de la conversión de bisulfito (kit de conversión de bisulfito de metilo de ADN recomendado) como plantilla, se recomiendan 50-100 ng por cada sistema de 50 μl.
2. Recomendar el procedimiento de reacción de PCR
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Temperatura |
Tiempo |
Ciclos |
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95 grados |
10-15 s |
30-40 |
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55-60 grado |
30 s |
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72 grados |
1 min/kb |
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72 grados |
5-10 minutos |
1 |
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4 grados |
Para siempre |
Nota
1. Se recomienda utilizar un programa especial de diseño de imprimaciones para diseñar imprimaciones. Para garantizar que el ADN transformado por bisulfito pueda amplificarse bien, se recomienda que los fragmentos amplificados no superen las 500 pb al diseñar los cebadores.
2. La optimización de la reacción de PCR se puede ajustar desde los aspectos de la concentración de Mg2+, la cantidad de plantilla, la cantidad de enzima, la temperatura de hibridación, etc.
3. La plantilla de ADN de congelación y descongelación repetida afectará la amplificación; si necesita muchos experimentos, se puede empaquetar y congelar para reducir la cantidad de congelación y descongelación.
¡Solo para uso en investigación!
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